microRNA定量PCR服务

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2017年3月9日

microRNA定量PCR服务

实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative PCR,qRT-PCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,从而对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR过程中,荧光染料能特异性掺入DNA双链,发出荧光信号,而不掺入双链中的染料分子不发出荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物增加完全同步。

miRNA是小的非编码RNAs,通过选择性的与互补的mRNA或3′ UTL序列结合控制着转录水平的基因表达。近30%哺乳动物基因受小RNA分子的调控,从而调节各种生物功能,包括发育、细胞分化、增殖、凋亡、维持 stemness和impriting。实时定量PCR由于其灵敏度高、方便快速成为检测miRNAs的一个不错选择。

技术优势

  • 灵敏度高
  • 实验周期短
  • 特异性高

应用方向

  • 快速地定量检测各种组织、原代细胞及细胞系中目的microRNA的表达情况
  • 对microRNA芯片或二代测序等高通量实验筛选得到的目的microRNA进行检测验证
  • 检测对监测疾病,特别是肿瘤的发生发展和各种治疗手段的效果

  • 流程

 

  • 产品参数
产品类型 平台 周期
microRNA qPCR   AriaMx 实时荧光定量 PCR 系统

样本种类 单个样本量
组织 100mg
血液 300μl
细胞 ≥5×106
RNA ≥1.5ug

OD260/OD280=1.8~2.0

microRNA ≥1.5ug

OD260/OD280=1.8~2.0

PS:同时提供待测miRNA序列号

  • 扩增曲线

  • 熔解曲线
  • 数据分析

采用相对定量法2-△△Cq来计算基因的相对表达量。

 

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